久久精品第一国产久精国产宅男66-成人精品免费网站-日韩不卡的av-亚洲成国产人片在线观看-波多野结av衣东京热无码专区-特黄一级片-亚洲日本中文字幕在线-黄色a∨-久久久774这里只有精品17-欧美日本成人-中文字幕第一区-精品综合-久久精品这里有-男女做性无遮挡免费视频-色综合天天综合欧美综合

技術文章

Technical articles

當前位置:首頁技術文章重組質體的限制酶分析

重組質體的限制酶分析

更新時間:2012-07-16點擊次數:1650
    儀器用具:
    微量離心機
    冰浴
    Mupid II 迷你電泳槽及鑄膠器
    UV transilluminator 及影像分析系統
    防護面罩
 
    藥品試劑:
    限制酶:BamHI, HindIII (20 U/μL, BioLabs)
    10×NE Buffer BamHI (0.1 M Tris-HCl, pH 7.9; 0.1 M MgCl2; 1.5 M NaCl; 10mM dithiothreitol)
    100×BSA (10 mg/mL bovine serum albumin) 使用前稀釋十倍成10×無菌水
 
    方法步驟:
    1) 正反應株,接種于3 mL LB/Amp 培養基,于37℃震蕩培養過夜后,以2.1 的方法抽取質體。
    2) 每一株每反應各取3 μL 質體,另取pQE31 及pBlueGus 每反應各3 μL,分別依下表進行HindIII 及BamHI 切割。
    3) 以1% agarose gel 進行電泳分析,由電泳圖譜挑選帶有gus DNA 片段的重組質體。
??  照相后的電泳膠片不要丟掉,可繼續進行Southern 轉印。
    限制酶分析請依照下列表格加入:
     # 各管置請于37℃反應至少1 h。